دىتىئوترېئىتول (DTT) كۆپ ئىشلىتىلىدىغان قايتا ھاسىل قىلغۇچ ماددا بولۇپ، يېڭى يېشىل قوشۇمچە ماددا دەپمۇ ئاتىلىدۇ. ئۇ ئىككى مېركاپتان گۇرۇپپىسى (-SH) بار كىچىك مولېكۇلالىق ئورگانىك بىرىكمە. قايتا ھاسىل قىلغۇچ خۇسۇسىيىتى ۋە مۇقىملىقى سەۋەبىدىن، DTT بىئوخېمىيە ۋە مولېكۇلا بىئولوگىيەسى تەجرىبىلىرىدە كەڭ قوللىنىلىدۇ.
DTT نىڭ ئاساسلىق رولى ئاقسىل ۋە باشقا بىئومولېكۇلالاردىكى دىسۇلفىد باغلىنىشىنى ئازايتىشتىن ئىبارەت. دىسۇلفىد باغلىنىشى ئاقسىلنىڭ قاتلىنىشى ۋە مۇقىملىقىنىڭ مۇھىم بىر قىسمى، ئەمما بەزى تەجرىبە شارائىتىدا، مەسىلەن، SDS-PAGE ئانالىزى، ئاقسىلنىڭ قايتا بىرىكمىسى ۋە قاتلىنىشى قاتارلىق ئەھۋاللاردا، ئاقسىلنىڭ بوشلۇق قۇرۇلمىسىنى ئېچىش ئۈچۈن دىسۇلفىد باغلىنىشىنى ئىككى تىئول گۇرۇپپىسىغا چۈشۈرۈش كېرەك. DTT دىسۇلفىد باغلىنىشى بىلەن رېئاكسىيە قىلىپ، ئۇلارنى مېركاپتان گۇرۇپپىسىغا ئايلاندۇرالايدۇ، شۇنىڭ بىلەن ئاقسىلنىڭ بوشلۇق قۇرۇلمىسىنى ئېچىپ، ئۇنى تەھلىل قىلىش ۋە باشقۇرۇشنى ئاسانلاشتۇرىدۇ.
DTT يەنە ئېنزىم پائالىيىتى ۋە مۇقىملىقىنى قوغداش ئۈچۈنمۇ ئىشلىتىلىدۇ. بەزى ئېنزىم كاتالىزاتورلۇق رېئاكسىيەلەردە، ئېنزىمنىڭ پائالىيىتى ئوكسىدلىغۇچى ماددا تەرىپىدىن تۆۋەنلىتىلىشى مۇمكىن. DTT ئوكسىدلىغۇچى ماددىلار بىلەن رېئاكسىيە قىلىپ، ئۇلارنى زىيانسىز ماددىلارغا ئايلاندۇرۇپ، ئېنزىمنىڭ پائالىيىتى ۋە مۇقىملىقىنى قوغدايدۇ.
β-مېركاپتوئېتانول (β-ME) قاتارلىق ئەنئەنىۋى قايتا كۈچەيتكۈچ ماددىلارغا سېلىشتۇرغاندا، DTT تېخىمۇ بىخەتەر ۋە مۇقىم قايتا كۈچەيتكۈچ ماددا دەپ قارىلىدۇ. ئۇ پەقەت سۇ ئېرىتمىسىدە مۇقىم بولۇپلا قالماي، يەنە يۇقىرى تېمپېراتۇرا ۋە كىسلاتا-ئاساسلىق شارائىتتا قايتا كۈچەيتكۈچ خۇسۇسىيىتىنى ساقلاپ قالىدۇ.
DTT نىڭ ئىشلىتىلىشى نىسبەتەن ئاددىي. ئادەتتە، DTT مۇۋاپىق بۇفېردا ئېرىتىلىدۇ ۋە ئاندىن تەجرىبە سىستېمىسىغا قوشۇلىدۇ. DTT نىڭ ئەڭ ياخشى قويۇقلۇقى كونكرېت تەجرىبىگە ئاساسەن بېكىتىلىشى كېرەك، ھەمدە ئادەتتە 0.1-1mM دائىرىسىدە ئىشلىتىلىدۇ. تۆۋەن قويۇقلۇق ھۈجەيرە ئۆسۈشىگە بولغان سەلبىي تەسىرنى ئازايتالايدۇ ۋە نىشان ئاقسىللارنىڭ ئارتۇقچە ئىپادىلىنىشىدىن كېلىپ چىققان ھۈجەيرە زەھەرلىكلىكىنى ئازايتالايدۇ. يۇقىرى قويۇقلۇق ھۈجەيرە ماددا ئالمىشىش يۈكىنىڭ ئېشىپ كېتىشىنى كەلتۈرۈپ چىقىرىپ، ھۈجەيرە ئۆسۈشى ۋە ئىپادىلەش ئۈنۈمىگە تەسىر كۆرسىتىشى مۇمكىن.
ئەڭ ياخشى قويۇقلۇقنى بېكىتىشنىڭ ئۇسۇلى، ھەر خىل قويۇقلۇقتا IPTG ئىندۇكسىيە سىنىقى ئېلىپ بېرىش ئارقىلىق نىشان ئاقسىلنىڭ ئىپادىلىنىش سەۋىيەسىنى باھالاشتىن ئىبارەت. كىچىك كۆلەملىك مەدەنىيەت سىنىقى IPTG قويۇقلۇق دائىرىسى (مەسىلەن، 0.1 mM، 0.5 mM، 1 mM قاتارلىقلار) ئارقىلىق ئېلىپ بېرىلىشى مۇمكىن، ھەر خىل قويۇقلۇقتىكى ئىپادىلىنىش ئۈنۈمىنى نىشان ئاقسىلنىڭ ئىپادىلىنىش سەۋىيەسىنى بايقاش ئارقىلىق (مەسىلەن، غەربىي داغ ياكى فلۇئورېسسېنسىيە بايقاش) باھالىغىلى بولىدۇ. تەجرىبە نەتىجىلىرىگە ئاساسلانغاندا، ئەڭ ياخشى ئىپادىلىنىش ئۈنۈمىگە ئىگە قويۇقلۇق ئەڭ ياخشى قويۇقلۇق قىلىپ تاللانغان.
بۇنىڭدىن باشقا، ئوخشاش تەجرىبە شارائىتىدا كۆپ ئىشلىتىلىدىغان IPTG قويۇقلۇق دائىرىسىنى چۈشىنىش ئۈچۈن ئالاقىدار ئەدەبىياتلارغا ياكى باشقا تەجرىبىخانىلارنىڭ تەجرىبىلىرىگە مۇراجىئەت قىلسىڭىز بولىدۇ، ئاندىن تەجرىبە ئېھتىياجىغا ئاساسەن ئەلالاشتۇرسىڭىز ۋە تەڭشىسىڭىز بولىدۇ.
ئەڭ ياخشى قويۇقلۇقنىڭ ھەر خىل ئىپادىلەش سىستېمىسى، نىشان ئاقسىللىرى ۋە تەجرىبە شارائىتىغا ئاساسەن ئوخشىماسلىقى مۇمكىنلىكىنى ئەسكەرتىش كېرەك، شۇڭا ھەر بىر ئەھۋالغا ئايرىم-ئايرىم ھالدا ئەڭ ياخشىسىنى تاللىغان ياخشى.
قىسقىسى، DTT كۆپ ئىشلىتىلىدىغان بىر خىل قايتۇرغۇچ ماددا بولۇپ، ئاقسىل ۋە باشقا بىئومولېكۇلالاردىكى دىسۇلفىد باغلىنىشىنى ئازايتىش ۋە ئېنزىم پائالىيىتى ۋە مۇقىملىقىنى قوغداش ئۈچۈن ئىشلىتىلىدۇ. ئۇ بىئوخېمىيە ۋە مولېكۇلا بىئولوگىيەسى تەجرىبىلىرىدە كەڭ قوللىنىلىپ كەلدى.
ئېلان قىلىنغان ۋاقىت: 2023-يىلى 9-ئاينىڭ 28-كۈنى